類胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附法） 【產(chǎn)品名稱】 通用名稱：類胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附法） 英文名稱：IGFBP-3 ELISA 【產(chǎn)品規(guī)格】 96T 【預(yù)期用途】 試劑盒用于體外定量測(cè)定人血清中胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3（IGFBP-3）的含量。 【前言簡(jiǎn)介】 胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）系統(tǒng)是正常體內(nèi)生長(zhǎng)和再生的主要調(diào)節(jié)因子，影響細(xì)胞增殖，分化和細(xì)胞凋亡。 此外，IGF-系統(tǒng)似乎改變胰島素敏感性和長(zhǎng)期性葡萄糖代謝。 許多流行病學(xué)，實(shí)驗(yàn)和臨床資料表明，IGF-系統(tǒng)也涉及幾種常見癌癥的發(fā)展以及常見疾病如動(dòng)脈粥樣硬化和2型糖尿病等。 IGF家族由一系列密切相關(guān)的多肽組成，其包括兩個(gè)主要促進(jìn)生長(zhǎng)的多肽，IGF-I和IGF-II，6種特異性高親和力IGF結(jié)合蛋白（IGFBP-1至-6）和一個(gè)大的非IGF結(jié)合糖蛋白，“酸不穩(wěn)定亞單位"（ALS）。 IGFBP-3是豐富的IGF結(jié)合蛋白，占健康人循環(huán)IGF結(jié)合能力的75％以上。 IGFBP-3與IGFBP-5共享功能特性，因?yàn)閮煞N肽都能與ALS和IGF-I或-II的形成高分子量約150千道爾頓的三元復(fù)合物。 然而，IGFBP-5循環(huán)濃度比IGFBP-3低得多，而在健康受試者中，三元復(fù)合物攜帶多達(dá)90％的IGFBP-3但只有約50％的IGFBP-5。 IGFBP被認(rèn)為是IGF-載體蛋白，穩(wěn)定血漿IGF水平并控制IGF從循環(huán)中流出至血管外隔室。此外，人們認(rèn)為 IGFBP復(fù)合IGF在生物學(xué)上或多或少無活性，被剝奪了與IGF-1受體相互作用的能力。但是，很快人們就發(fā)現(xiàn)，在一些實(shí)驗(yàn)設(shè)置中，IGFBP激活而不是抑制IGF-I介導(dǎo)的作用，因此，IGFBP通常被稱為IGF-1生物活性的調(diào)節(jié)劑。另外，大多數(shù)的IGFBP，特別是IGFBP-3，發(fā)揮著IGF-I和IGF-I受體的獨(dú)立作用，可能涉及位于細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的特定受體間的相互作用。例如，IGFBP-3現(xiàn)在被認(rèn)為是作為抗癌分子服務(wù)的，它可以明顯防止幾種常見的癌癥，同時(shí)IGFBP-3在培養(yǎng)的脂肪細(xì)胞中對(duì)胰島素信號(hào)的傳導(dǎo)作用也被提出。 三元復(fù)合物的轉(zhuǎn)換非常緩慢，一天中IGFBP-3的血漿濃度始終保持穩(wěn)定，而不受短期營(yíng)養(yǎng)變化的影響。 因此，IGFBP-3的水平可以由一個(gè)單獨(dú)測(cè)量確定。 GH是IGFBP-3以及IGF-I和ALS的主要調(diào)節(jié)因子，因此，三種多肽水平在青春期生長(zhǎng)期間增加，其后隨著年齡的增長(zhǎng)逐漸下降。 在兒童中，IGFBP-3已顯示與24小時(shí)GH分泌相關(guān)，因此，IGFBP-3可能對(duì)兒童GH缺陷的診斷有幫助。 【檢測(cè)原理】 GFBP3-ELISA是固相酶擴(kuò)增敏感性對(duì)微孔板進(jìn)行的免疫測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)品和樣品與包被的捕獲單克隆抗體（MAb 1）和用辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的單克隆抗體（MAb 2）反應(yīng)。經(jīng)過孵育形成一個(gè)三明治結(jié)構(gòu)：包被的MAb 1 - -人IGFBP3--MAb 2-HRP，洗滌微孔板以除去未結(jié)合的酶標(biāo)記抗體。通過顯色測(cè)量結(jié)合的酶標(biāo)記抗體反應(yīng)。加入顯色溶液（TMB）并孵育。添加終止液終止反應(yīng)，然后在適當(dāng)波長(zhǎng)下讀取微孔板。被測(cè)物含量的顯色程度與人IGFBP3濃度成正比。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品中IGFBP3濃度通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可直接讀取。 【試劑盒組成成分】
| 成分 | 規(guī)格（96T） | 狀態(tài) |
PLATE | 96孔微量滴定板，包被了IGFBP3（單克隆抗體） | 96孔 | 即用型 |
AbHRP CONC | 酶標(biāo)記物濃縮液：HRP標(biāo)記的抗IGFBP3（單抗），含procin和牛血清白蛋白的檸檬酸緩沖液 | 0.5ml*1瓶 | 用酶標(biāo)記物緩沖液20倍稀釋 |
CONJ BUF | 酶標(biāo)記物緩沖液：含有牛血清白蛋白和百里酚的tris緩沖液 | 10ml*1瓶 | 即用型 |
CAL N | 標(biāo)準(zhǔn)品-N=1-5，含牛血清和百里酚的磷酸鹽緩沖液。 瓶體標(biāo)簽上有具體濃度。 標(biāo)準(zhǔn)品都是預(yù)稀釋過的，用稀釋液做0標(biāo)準(zhǔn)品。 | 5瓶?jī)龈煞?/span> | 加入1ml蒸餾水 |
DIL BUF | 稀釋液：含有牛血清，牛白蛋白和百里酚的磷酸鹽緩沖液 | 100ml*1瓶 | 即用型 |
CONTROL N | 質(zhì)控品N=1或2 ，含有人血清和百里酚，質(zhì)控品是預(yù)稀釋過的 | 2瓶?jī)龈煞?/span> | 加入1ml蒸餾水 |
WASH SOLN CONC | 洗滌液（tris-HCL） | 10ml*1瓶 | 蒸餾水200倍稀 釋（使用電磁攪拌器） |
CHROM TMB | 底物液：TMB | 12ml*1瓶 | 即用型 | STOP SOLN | 終止液：1.0N鹽酸 | 12ml*1瓶 | 即用型 |
注意： 用稀釋液做0標(biāo)準(zhǔn)品。 校準(zhǔn)品是針對(duì)NIBSC / WHO重組的IGFBP-3的標(biāo)準(zhǔn)化物質(zhì)，參考試劑編號(hào)93/560。 所需材料（未提供） 高質(zhì)量的蒸餾水 50ul,100ul,1ml的微量移液器（推薦使用一次性塑料槍頭的移液器） 稀釋樣品的塑料管 旋渦攪拌器 磁力攪拌器 酶標(biāo)儀（450或者650nm） 洗板機(jī)
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