犬IL-10檢測試劑盒（ELISA）
犬IL-10檢測試劑盒產(chǎn)品詳細(xì) | 中文名稱 | 犬IL-10檢測試劑盒（ELISA法） | | 英文名稱 | RayBio® Canine IL-10 ELISA Kit | | 產(chǎn)品貨號(hào) | ELH-IL-10 | | 產(chǎn)品規(guī)格 | 96T | | 檢測樣本 | 血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液 | | 適應(yīng)物種 | 犬 | | 預(yù)期用途 | 定量測定犬血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-10的含量 | | 產(chǎn)品品牌 | 美國RayBio | | 供應(yīng)商家 | 深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司 |
犬IL-10試劑盒預(yù)期用途 RayBio®犬IL-10試劑盒采用體外酶聯(lián)免疫吸附測定法，定量測定犬血清（犬IL-10濃度在正常血清/血漿中較低，并且在該測定中可能檢測不到）血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-10的含量。
犬IL-10檢測試劑盒檢測原理 犬IL-10檢測試劑盒使用包被有犬IL-10特異性抗體的96孔酶標(biāo)板，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品被加入到孔中，樣品中存在的IL-10通過固相的抗體與孔結(jié)合。洗滌后加入生物素化的抗犬IL-10抗體。 洗去未結(jié)合的生物素化抗體后，將HRP-標(biāo)記的鏈霉素加入到到孔中。 再次洗滌板孔，向孔中加入TMB底物溶液，底物顯色與所結(jié)合的IL-10量成比例。 加入終止液顏色從藍(lán)色變?yōu)辄S色，并且在450nm處測量顏色的吸光度值。
犬IL-10檢測試劑盒組成成分
| 組分 | 表述 | 儲(chǔ)存/預(yù)準(zhǔn)備后穩(wěn)定性 | | IL-10酶標(biāo)板（項(xiàng)目A） | 12*8=96孔，包被有抗小鼠IL-10抗體 | 4℃ 1個(gè)月 | | 濃縮洗滌液（20x）（項(xiàng)目B） | 20x濃縮溶液 25ml | 4℃ 1個(gè)月 | | 標(biāo)準(zhǔn)蛋白（項(xiàng)目C） | 2瓶小鼠IL-10。1個(gè)小瓶就夠配制每個(gè)一式兩份的標(biāo)準(zhǔn)品。 | -80℃1周 | | 檢測抗體IL-10（項(xiàng)目F） | 2瓶生物素化的抗小鼠IL-10。
每個(gè)小瓶足以測定微板的一半。 | 4℃ 5天 | | 濃縮HRP-鏈霉親和素（項(xiàng)目G） | 200μl 350X濃縮HRP綴合鏈霉親和素 | 不能保存和重新使用 | | 一步法TMB底物（項(xiàng)目H） | TMB溶液12ml | N/A | | 終止液（項(xiàng)目I） | 8ml 0.2M硫酸 | N/A | | 測定稀釋劑D（項(xiàng)目K） | 15ml 5X濃縮液 | 4℃ 1個(gè)月 | | 測定稀釋劑B（項(xiàng)目E） | 15ml 5X濃縮液 | 4℃ 1個(gè)月 | | 將未使用的板條重新裝回到含有干燥劑包的袋中，沿著整個(gè)邊緣重新密封。 |
犬IL-10檢測試劑盒存儲(chǔ)條件
犬IL-10檢測試劑盒可在-20°C下保存，從裝運(yùn)之日起存放可長達(dá)1年。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。 試劑盒可以在4℃下儲(chǔ)存長達(dá)6個(gè)月。 對(duì)于更長時(shí)間儲(chǔ)存時(shí)，建議儲(chǔ)存在-80°C。 該試劑盒組分見下表。
犬IL-10檢測試劑盒檢測步驟
1.使用前將所有試劑和樣品置于室溫（18 - 25oC）。建議所有標(biāo)準(zhǔn)和樣品至少重復(fù)一次。
2.根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)標(biāo)記可拆卸的8孔條。
3.分別加入樣品和每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品100μl（參見試劑制備步驟3）到適當(dāng)?shù)陌蹇字?。蓋上蓋子，室溫溫和振蕩孵育2.5小時(shí)
4.棄去溶液，用1X洗滌液洗滌4次。使用多通道移液器或自動(dòng)洗板機(jī)洗板，每孔加入洗滌緩沖液（300μl）。每個(gè)步驟中去除液體對(duì)于良好的性能是至關(guān)重要的。洗完后，通過吸取或傾析清除任何剩余的洗滌緩沖液。倒置板并用干凈的吸水紙吸干印跡。 5.每孔加入100μl1X制備的生物素化抗體（試劑制備步驟6）。在室溫下溫和振蕩孵育1小時(shí)。
6.棄去溶液。重復(fù)洗滌，如步驟4。
7.加入100μl制備的鏈霉親和素溶液（見試劑制備步驟7）。在室溫下溫和搖動(dòng)孵育45分鐘。
8. 棄去溶液。 重復(fù)洗滌，如步驟4。
9.向每個(gè)孔中加入100μlTMB一步底物試劑（項(xiàng)目H）。在室溫下在黑暗中輕輕振蕩孵育30分鐘。
10.向每個(gè)孔中加入50μl終止液（項(xiàng)目I）。 立即讀取450 nm處吸光度值。
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