中文名稱：利什曼蟲IgG檢測(cè)試劑盒 英文名稱：Leishmania IgG test kit 產(chǎn)品規(guī)格：96T 預(yù)期用途： 利什曼蟲IgG檢測(cè)試劑盒可用于定性篩選血清中的內(nèi)臟利什曼原蟲IgG抗體 。僅用于科研使用。 摘要介紹： 利什曼蟲是一種影響了世界上數(shù)百萬人口的普遍疾病。從范圍來看，利什曼蟲已經(jīng)成為一種遍布各大洲嚴(yán)重的感染病，尤其是歐洲，印度，亞洲，非洲和中東地區(qū)。內(nèi)臟利什曼病，又稱為黑熱病，是通過被感染的白蛉叮咬傳播給人類的，這種白蛉寄生于杜氏利什曼蟲復(fù)合體。當(dāng)白蛉與接觸感染對(duì)象（比如狗）接觸后就成為利什曼蟲的宿主了。由于內(nèi)臟利什曼蟲攻擊肝脾等內(nèi)臟系統(tǒng)以及免疫系統(tǒng)，通常利什曼蟲已與AIDS感染密切相關(guān)。內(nèi)臟利什曼原蟲是一種高死亡率的嚴(yán)重疾病。 幾種測(cè)試方法已用于診斷急性內(nèi)臟利什曼病。例如，間接熒光免疫抗體測(cè)試（IFAT)和直接凝集實(shí)驗(yàn)（DAT）是實(shí)踐中的兩個(gè)血清學(xué)診斷方法，這是因?yàn)榭估猜x抗體的滴度在急性階段通常很高。另一個(gè)不太成功的方法是骨髓穿刺。這種方法不僅痛苦和危險(xiǎn)，而且成功率也不高。另外，ELISA方法是常用的血清學(xué)診斷方法，有時(shí)會(huì)與IFAT和DAT結(jié)合使用。 檢測(cè)原理： 利什曼蟲的IgG檢測(cè)試劑盒原理是一個(gè)三步溫育過程，即初次溫育涉及利什曼蟲抗原在ELISA板孔上的包被。在這一步中，任何與抗原反應(yīng)的抗體都會(huì)結(jié)合到板孔中。然后，洗凈板孔除去測(cè)試樣品。隨后加入酶標(biāo)記物。在第二次溫育時(shí)，酶標(biāo)記物將與任何存在的抗體結(jié)合。在第三次溫育前，需要充分洗滌板孔。然后加入顯色劑四甲基聯(lián)苯胺（TMB)。酶標(biāo)記物催化過氧化氫的氧化反應(yīng)，顯色劑變?yōu)樗{(lán)色。加入終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)槊髁恋狞S色。反應(yīng)即終止?？捎妹笜?biāo)分析儀讀取實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 組成成分： 名稱 | 數(shù)量 | 成分 | ELISA板 | 96T | 包被了利什曼蟲抗原的微量滴定板 | 酶標(biāo)記物 | 1×11ml/瓶 | 含硫柳泵穩(wěn)定緩沖液的辣根過氧化物酶（HRP)。 | 陽(yáng)性質(zhì)控 | 1×1ml/瓶 | 含硫柳泵緩沖液的稀釋利什曼蟲陽(yáng)性人血清。 | 陰性質(zhì)控 | 1×1ml/瓶 | 含硫柳泵緩沖液的稀釋利什曼蟲陰性人血清。 | TMB底物溶液 | 1×11ml/瓶 | TMB顯色劑。 | 濃縮洗滌液20X | 1×25ml/瓶 | 濃縮緩沖液和表面活性劑。 | 稀釋緩沖液 | 2×30ml/瓶 | 緩沖蛋白溶液。 | 終止液 | 1×11ml/瓶 | 濃度為1mol/L的磷酸。 |
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試驗(yàn)需要但未提供的設(shè)備： 1. 移液管 2. 洗滌板條用的擠壓瓶 3. 去離子水 4. 帶有450nm和620-650nm波長(zhǎng)濾光片的酶標(biāo)分析儀（可選目測(cè)讀取結(jié)果） 5. 血清稀釋用試管 實(shí)驗(yàn)步驟： 1. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上2個(gè)質(zhì)控品決定所需的板條數(shù)，并將其放置在托架上。 2. 加入100µl的陰性質(zhì)控至1號(hào)孔，100µl的陽(yáng)性質(zhì)控至2號(hào)孔，以及將100µl稀釋過的樣品（1：40）溶液加入到剩下的孔中。（已稀釋） 3. 在室溫（15-25℃）下溫育10分鐘。 4. 震蕩甩出洗滌液，并用稀釋過的洗滌緩沖液清洗三次。 5. 每孔加入2滴酶標(biāo)物。 6. 室溫下溫育10分鐘。 7. 震蕩甩出洗滌液，并用洗滌緩沖液清洗三次。 8. 每孔加入2滴顯色劑。 9. 在室溫下溫育5分鐘。 10. 加入2滴終止液，輕敲ELISA板使孔內(nèi)溶液混合。 11. 對(duì)空氣讀數(shù)調(diào)零后讀取450nm處的OD值（參考波長(zhǎng)620-650nm）
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