| 按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項(xiàng)采集樣品，血液樣品自采集到實(shí)驗(yàn)時(shí)都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?；鞚岬臉悠窇?yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。 | |||
| 儲(chǔ)存 | 2-8℃ | ≤-20℃ | 避免太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融。 |
| 穩(wěn)定性 | 48小時(shí) | ＞48小時(shí) | |
| 4×2ml | CAL A-D | 標(biāo)準(zhǔn)品A-d：PBS稀釋的人血清，內(nèi)含抗脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG抗體，另含0.01%的Methylisothiazolone和0.01%的Bromonitrodioxane，即用。 |
| 1×14ml | ENZCONJ IgG | 酶聯(lián)物：辣根過氧酶標(biāo)記的抗人IgG和蛋白緩沖液。另含0.01%的Methylisothiazolone和0.01%的Bromonitrodioxane及5mg/l的ProclinTM，即用。 |
| 1×12×8 | MTP | 包被板：12條8孔的包被板，包被了脊髓灰質(zhì)炎抗原（純化病毒材料的疫苗，混合有1，2，3型病毒），即用。 |
| 1×14ml | TMB SUBS | TMB底物液，內(nèi)含TMB，即用。 |
| 1×14ml | TMB STOP | TMB終止液，0.5M的硫酸，即用。 |
| 1×60ml | DILBUF | 稀釋緩沖液，PBS/BSA緩沖液，內(nèi)含0.095%的疊氮鈉，即用。 |
| 1×60ml | WASHBUF CON | 洗滌緩沖液，10倍濃縮，PBS+吐溫20。 |
| 2× | FOIL | 粘性金屬板，溫育期間用來蓋板用。 |
| 1× | BAG | 塑料袋，可重新密封，用來儲(chǔ)存不用的板條。 |
| 稀釋/溶解 | 成分 | | 稀釋劑 | 比例 | 備注 | 儲(chǔ)存 | 穩(wěn)定性 |
| 60ml | 洗滌液 | 加入540ml | 蒸餾水 | 1：10 | 如果有必要的話，加熱到37℃以溶解所有晶體，混合均勻 | 2-8℃ | 8周 |
| 樣品 | 稀釋 | 稀釋劑 | 比例 | 備注 |
| 血清/血漿 | 一般規(guī)律稀釋 | 稀釋緩沖液 | 1：101 | 5ul+500ul |
| 1 | 給標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品（雙份檢測(cè)）準(zhǔn)備足夠的板條，留一孔做空白對(duì)照。 |
| 2 | 將稀釋好的樣品、即用的標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品各100ul分別加入到相應(yīng)的微孔中，留出空白孔不要加，用來加底物液。 |
| 3 | 蓋板，室溫溫育60分鐘。 |
| 4 | 棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，并加入300ul稀釋好的洗滌液，重復(fù)洗板3次，棄取孔內(nèi)反應(yīng)夜后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。 |
| 5 | 在每一微孔中加入100ul即用型的酶聯(lián)物，留出空白孔不要加。 |
| 6 | 蓋板，室溫溫育30分鐘。 |
| 7 | 棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，并加入300ul稀釋好的洗滌液，重復(fù)洗板3次，棄取孔內(nèi)反應(yīng)夜后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。 |
| 8 | 在每一微孔中加入100ul即用型的底物液，留出空白孔不要加。 |
| 9 | 蓋板，室溫避光溫育20分鐘。 |
| 10 | 在每一微孔中加入100ul即用型的終止液以終止底物反應(yīng)，空白孔也要加底物液。 |
| 11 | 充分混合，450nm處讀取OD值，溶液所顯示的顏色60min內(nèi)穩(wěn)定。 |
| | OD值 | 矯正后的OD值 | 平均OD值 |
| 空白孔 | 0.019 | | |
| 標(biāo)準(zhǔn)品A（陰性質(zhì)控） | 0.112/0.134 | 0.103/0.115 | 0.109 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品B（臨界質(zhì)控） | 0.410/0.472 | 0.391/0.453 | 0.421 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品C（弱陽(yáng)性質(zhì)控） | 1.069/1.121 | 1.050/1.102 | 1.076 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品D（陽(yáng)性質(zhì)控） | 2.186/2.220 | 2.167/2.201 | 2.184 |
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