2） 在檢測開始之前，仔細和完整的閱讀說明書，使用試劑盒提供的包裝插件的有效版本， 確保所有的程序都清楚。尋求更多信息（比如：臨床背景，檢測操作，自動化操作說明，可選擇的軟件，文獻等等），請查看IBL公司主頁。
| 注意 | 人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMT抑制劑，還有降血壓類藥物。 |
| 可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml 6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。 | ||
| 貯存 | ≤-20℃ | 避免熱源或太陽直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。 |
| 穩(wěn)定性 | 6個月 | |
| 注意 | 試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測或間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素共同檢測時所需的試劑成分 |
| 數(shù)量 | 標(biāo)記 | 成分 |
| 1×50mL | ASSAYBUF CONC | 檢測緩沖液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液，BSA（牛血清白蛋白），1%的NaN3 |
| 1×2.25mL | ACYLREAG | ?；噭?，即用，內(nèi)含二甲基甲酰胺 |
| 1×10mL | INDICATIORBUF | 指示劑緩沖液，紫色，即用，內(nèi)含Tris緩沖液和苯酚紅（pH小于7.5時顏色會發(fā)生變化）。 |
| 2×50× | HYDRTUB | 水解試管，可處理的聚苯乙烯試管 |
| 1×20mL | HCl | HCl，即用，內(nèi)含0.1M HCl |
| 1×12×8 | MTP | 包被板，可拆分，包被有抗兔IgG（羊，多克?。?/span> |
| 1×7×0.35mL | CAL A-G | 標(biāo)準(zhǔn)品，A-G含去甲變腎上腺素和0.1M的HCl 0; 77; 192; 480; 1200; 3000; 7500μmol/L 0; 0.42; 1.05; 2.63; 6.56; 16.4; 41.0μmol/L |
| 1×2×0.5mL | CONTROL 1+2 | 質(zhì)控1+2，即用，濃度及允許范圍請見標(biāo)簽 |
| 3× | BIOTIN LYO | 去甲變腎上腺素生物素（凍干品），內(nèi)含去變甲狀腺生物素, Tris緩沖液,<0.1%NaN3（可再生） |
| 1×7m L | ANTISERUM | 去甲變腎上腺素抗血清，內(nèi)含含抗血清（兔）,磷酸緩沖液,0.1%NaN3 |
| 1×250μl | ENZCONJ CONC | 酶聯(lián)物（100×），含抗生物素抗體,并聯(lián)結(jié)到堿性磷酸酶上,Tris緩沖液,0.01%NaN3 |
| 9× | PNPP SUBS | PNPP底物片，含PNPP |
| 1×27mL | PNPP BUF | PNPP底物緩沖液，含二乙醇胺、水和0.05%NaN3 |
| 1×15mL | PNPP STOP | PNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。 |
| 1×50mL | WASHBUF CONC | 洗滌液（10×），含Tris緩沖液,HCL,吐溫,0.2%NaN3 |
| 3× | FOIL | 粘性金屬板 |
8、注意事項
7） 包被板的清洗很重要，清洗不合理將會導(dǎo)致錯誤的實驗結(jié)果。建議使用多孔移液器或自動包被板清洗系統(tǒng)進行清洗。溫育期間避免微孔干燥，清洗和吸液時不要碰到包被板微孔。清洗時，確保所有的微孔都充滿蒸餾水，并且無殘留物。
8） 濕度會對包被孔產(chǎn)生影響，所以包被板未平衡到室溫時不要打開包裝。不使用的微孔應(yīng)立即裝入含干燥劑的包裝袋中。
9、實驗前的準(zhǔn)備說明
| 注意 | 這種96人份的試劑盒可分成3份獨立進行，以下體積為4條（32人份）一次檢測所需體積。如果想把標(biāo)準(zhǔn)品從7份減到6份，可以把標(biāo)準(zhǔn)品G棄取。而允許范圍相應(yīng)的減少到3000μg/l。 |
| 特別注意 | 如果你使用甲狀腺ELISA試劑盒來同時檢測間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素，請勿混合間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素酶聯(lián)物。 | ||||||
| 稀釋/溶解 | 成分 | | 稀釋 | 比例 | 備注 | 貯存 | 穩(wěn)定性 |
| 15mL | 檢測用緩沖液 | 150mL | 雙蒸水 | 1:10 | | 2-8°C | 2周 |
| 15mL | 洗滌液 | 150mL | 雙蒸水 | 1:10 | | 2-8°C | 4周 |
| 1瓶 | 去甲變腎上腺素生物素 | 2mL | 稀釋的檢測緩沖液 | | 臨時配制,僅使用一次,靜置5min,混合時避免氣泡. | ≤-20°C | 2個月 |
| 60μl | 酶聯(lián)物 | 6mL | 稀釋的檢測緩沖液 | 1:101 | 臨時配制,僅使用一次 | 18-25°C | 5小時 |
| 3 | PNPP底物片 | 8mL | PNPP底物緩沖液 | | 臨時配制,僅使用一次 | 18-25°C | 5小時 |
| 注意 | 水解這一步驟在總?cè)ゼ鬃兡I上腺素和總間甲腎上腺素的檢測中是*的。而在游離去甲變腎上腺素和變腎上腺素的檢測中則無須水解。樣品被懷疑高于zui高標(biāo)準(zhǔn)的樣品必須在水解步驟前用0.1M HCL進行稀釋。 |
9.2.1水解試管中樣品的準(zhǔn)備
1） 將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品各10μL加入到相應(yīng)的水解試管中
2） 在每一試管中加入40μL0.1M的HCl。
3） 蓋好試管，90°C下水解1h（用溫度計測溫度）。之后平衡至室溫，旋渦混合。
4） 在每一試管中加入100μL指示劑緩沖液，旋渦混合。
5） 在每一試管中加入20μL的?；饔迷噭尤胫甘緞┖罅⒓凑鹗?，確保加入的?；噭┖驮嚬軆?nèi)物質(zhì)*混合。
6） 蓋好試管，室溫下溫育15min。
7） 在每一試管中加入1mL稀釋的檢測緩沖液。
10、實驗步驟
1） 將?；瘶?biāo)準(zhǔn)品、?；|(zhì)控品和?；∪藰悠贩謩e50μL加入到相應(yīng)的微孔中。
2） 在每一微孔中加入50μL去甲變腎上腺素生物素。
3） 在每一微孔中加入50μL去甲變腎上腺素抗血清。
4） 蓋板，小心振蕩包被板。振蕩器（500rpm）上室溫溫育1h（500rpm）
5） 移去粘性金屬板。棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250μL洗滌液洗板6次（洗板機洗）,（人工清洗則洗3次即可），吸水紙上拍干。
6） 在每一微孔中加入150μL臨時配制的酶聯(lián)物。
7） 蓋上一新的粘性金屬板。振蕩器（500rpm）上室溫（18-25℃）溫育30min。
8） 移去粘性金屬板。棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250μL洗滌液洗板6次（洗板機洗）,（人工清洗則洗3次即可），吸水紙上拍干。
9） 如果有條件的話，使用8孔微量移液器加底物液和終止液時。確保底物液和終止液都是相同的時間間隔加入。使用自動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。
10） 在每一微孔中加入100μL臨時配制的PNPP底物液。
13） 加入終止液后60min之內(nèi)在405nm處測OD值（參考波長：60 0-650nm）
11、結(jié)果計算
：,26680196 郵政編碼：518067
深圳市科潤達生物工程有限公司 版權(quán)所有 主營：TNF-α檢測試劑盒|HMGB1多克隆抗體|糖代謝相關(guān)檢測試劑|美國Invitrogen細胞因子
ICP備案號:粵ICP備18097826號 管理登陸 技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 總流量：450117 網(wǎng)站地圖
