選擇基本培養(yǎng)基時(shí)，除待培養(yǎng)植物的基因型外，通常應(yīng)考慮培養(yǎng)基的種類(lèi)，其總離子濃度、總氮水平及氮源種類(lèi)（硝態(tài)氮和銨態(tài)氮）與比例、鈣和氯化物的含量等。草本植物組織培養(yǎng)廣泛使用的MS培養(yǎng)基，而木本植物組織培養(yǎng)通常采用低鹽基本培養(yǎng)基如1/2或1/4MS或WPM（Woody Plant Medium，木本植物培養(yǎng)基）。除總離子濃度外，總氮水平、氮源種類(lèi)（硝態(tài)氮和銨態(tài)氮）與比例也對(duì)組織培養(yǎng)影響甚大，因此根據(jù)具體情況改變基本培養(yǎng)基的氮源類(lèi)型和濃度，可以提高培養(yǎng)效果[15~17]。
不同基因型可能需要不同的基本培養(yǎng)基，但同一種植物在培養(yǎng)的不同階段或適用于不同的培養(yǎng)目的時(shí)，所需基本培養(yǎng)基也不同。通常按培養(yǎng)階段和目的可劃分為啟動(dòng)或誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基等多種，這種劃分可能僅僅是激素的調(diào)整，或同一基本培養(yǎng)基某些成分的改變，甚至基本培養(yǎng)基種類(lèi)的不同。如大多數(shù)植物在生根培養(yǎng)時(shí)使用1/2~1/4 MS或其他低鹽培養(yǎng)基如White培養(yǎng)基，體細(xì)胞胚胎發(fā)生也經(jīng)常在不同階段要改變氮源的類(lèi)型和比例等?；九囵B(yǎng)基種類(lèi)也可能影響到生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的作用效果，因此需要考慮不同基本培養(yǎng)基與不同濃度的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)之間的互作。
通常在對(duì)一種植物進(jìn)行組織培養(yǎng)前，首先應(yīng)查尋同屬、同種或同品種植物組織培養(yǎng)的有關(guān)資料，參考前人的研究成果。無(wú)法查找到有關(guān)資料，可以一些的基本培養(yǎng)基如MS、WPM或B5等開(kāi)始試驗(yàn)。如果對(duì)現(xiàn)有的基本培養(yǎng)基的篩選效果不理想，可以以MS、WPM或B5等基本培養(yǎng)基為基礎(chǔ)進(jìn)行改良，改良的方法一般有以下幾種：
（1）將基本培養(yǎng)基的大量成分或無(wú)機(jī)鹽成分減半至減四分之三（1/2，1/3，2/3，1/4，或3/4），或不同基本培養(yǎng)基成分組合如將B5的無(wú)機(jī)鹽成分與MS的有機(jī)成分組合在一起等；
（2）增減氮源水平及調(diào)銨態(tài)氮和硝態(tài)氮（銨鹽和硝酸鹽）的種類(lèi)和比例，氮源通常對(duì)培養(yǎng)物的質(zhì)量和發(fā)育路線影響較大；
（3）增加鈣鹽，以改善木本植物培養(yǎng)中的鈣缺乏；
（4）附加多種維生素、氨基酸及有機(jī)添加物，這對(duì)營(yíng)養(yǎng)需求復(fù)雜或難培養(yǎng)的植物較為有效；
（5）對(duì)植物生長(zhǎng)土壤及體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定，給基本培養(yǎng)基改良提供參考；
（6）將無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)成分及生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素劃分為高、中、低三個(gè)水平，進(jìn)行81（34）種組合試驗(yàn)，這樣更為?？傊赏ㄟ^(guò)培養(yǎng)基質(zhì)量（成分）和數(shù)量（濃度）調(diào)整，優(yōu)化和選擇與既定植物材料的特定要求相適合的基本培養(yǎng)培養(yǎng)基。
植物組織培養(yǎng)基中經(jīng)常改變的因子是生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)，尤其是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的種類(lèi)、數(shù)量和比例通常根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或激素的性質(zhì)與功能確定。但更科學(xué)的方法是采用單因子試驗(yàn)法和多因子試驗(yàn)法（正交設(shè)計(jì)），這樣可以采用生物統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。如以一種基本培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，將生長(zhǎng)素（如NAA）和細(xì)胞分裂素（如BA）各以 9種濃度水平（0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 mg/l）組合成81種處理，可以得到好的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素濃度水平的組合。正交設(shè)計(jì)雖然科學(xué)合理，考慮到了兩類(lèi)激素之間的互作，但工作量較大。
實(shí)踐中也可以采用固定生長(zhǎng)素濃度，改變細(xì)胞分裂素種類(lèi)或濃度，選擇優(yōu)的細(xì)胞分裂素種類(lèi)和濃度；以及反過(guò)采用同樣的方法也可對(duì)生長(zhǎng)素進(jìn)行選擇?；蛘哂袝r(shí)為減少工作量，可代表性地配制數(shù)量較少的幾種組合（如生長(zhǎng)素濃度相對(duì)高的一種，細(xì)胞分裂素濃度高的一種，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素相平衡的一種），首先確定那類(lèi)較為適合，然后根據(jù)適合的一類(lèi)，利用單因子或多因子試驗(yàn)法進(jìn)一步確定適激素組合。確定適光照和溫度等因子的方法也同此。
制備、滅菌與消毒：
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?nbsp;
了解培養(yǎng)基的配制原理；掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟；了解常見(jiàn)滅菌、清毒基本原理及方法；掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過(guò)濾除菌的操作方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因素和水。根據(jù)微生物的種類(lèi)和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有不同的種類(lèi)和配制方法。
牛肉gao蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用廣泛和普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱(chēng)為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需要的基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，所以可供微生物生長(zhǎng)繁殖之用。
干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過(guò)升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。
三、試劑與器材
1.器材
試管、三角瓶、燒杯、量筒、玻璃棒、培養(yǎng)基、分裝器、天平、牛角匙、高壓蒸汽滅菌鍋、pH度紙、棉花、牛皮紙、記號(hào)筆、麻繩、紗布、吸管、培養(yǎng)皿、電烘箱、注射器、微孔濾膜過(guò)濾器、鑷子等。
2.試劑 牛肉gao、蛋白胨、NaCl、瓊脂
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1.稱(chēng)量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2.干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開(kāi)箱取物
3.高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
4.過(guò)濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
五、關(guān)鍵步驟及注意事項(xiàng)
1.要嚴(yán)格按配方配制。
2.調(diào)pH不要過(guò)頭。
3.干熱滅菌要注意物品不要堆放過(guò)緊，注意溫度的時(shí)間控制，70ºC以下放物、取物。
4.高壓滅菌要注意物品不要過(guò)多，加熱后排除冷空氣，到時(shí)降壓回零取物。
5.過(guò)濾除菌要注意各部件滅菌，壓濾時(shí)，壓力要適當(dāng)，不可太猛太快，濾膜要注意清洗保存。
